“ToneScript cDNA 第一链合成试剂盒”参数说明
是否有现货: | 是 | 认证: | 详情电联 |
级别: | 实验纯LR | 用途: | 实验室 |
含量: | 对照品 | 应用: | 科学研究 |
型号: | 50次量/盒 | 规格: | 50次量/盒 |
商标: | 同科生物 | 包装: | 厂家包装 |
产量: | 1000000 |
“ToneScript cDNA 第一链合成试剂盒”详细介绍
产品名称:ToneScript cDNA 第一链合成试剂盒
英文名称:First-Strand cDNA Synthesis Kit
产品描述:ToneScript cDNA第一链合成试剂盒是专门用于两步法RT-PCR的第一步,含有合成高质量第一链cDNA所需的所有成分,适用于后续的PCR、qPCR以及基因克隆。采用的是无RNase H活性的M-MLV逆转录酶,避免了第一链cDNA合成过程中RNA/DNA杂交体中RNA被降解,具有高效的逆转录活性,适合合成长达9 k的cDNA片段。
产品特点:优化配制了用于第一链cDNA合成反应的各种成分,试剂盒中的ToneScript M-MLV具有高效的逆转录活性,避免了第一链cDNA合成过程中RNA/DNA杂交体中RNA被降解,具有高效的逆转录活性。适合后续的PCR、定量PCR以及PCR克隆,适用于各种PCR耐热聚合酶。
应用举例:反转录性
常见问题解析:1、 没有RT-PCR产物或产量低◆RNA模板降解。RNA 的纯度和完整对于反转录得到全长cDNA是非常重要的。提取的RNA应进行电泳检测以确定其是否降解。同时RNA要避免多次反复冻融。◆RNA模板纯度低。提取RNA的过程中,可能残留一些盐离子、试剂,如 EDTA、酚、胍盐、磷酸盐、多胺等抑制接下来的反转录反应。建议用75%乙醇(DEPC 水配制)仔细清洗RNA沉淀。◆引物不合适。选择合适的引物,当RNA是细菌RNA或者是没有polyA尾的RNA要选择随机引物或者特异引物。◆目的基因含有复杂二级结构或高GC含量。建议选择随机引物进行反转录。将反转录温度提高至55℃。2、RT-PCR 产物比预期长◆RNA 中很可能污染了DNA。真核生物基因组DNA中含有内含子,可能参与了 PCR扩增,可以在反转录之前对RNA进行DNaseI的消化。3、阴性对照中有RT-PCR产物◆阴性对照中有RT-PCR产物也表明有DNA的污染。在反转录之前对RNA进行DNase I 的消化。
英文名称:First-Strand cDNA Synthesis Kit
产品描述:ToneScript cDNA第一链合成试剂盒是专门用于两步法RT-PCR的第一步,含有合成高质量第一链cDNA所需的所有成分,适用于后续的PCR、qPCR以及基因克隆。采用的是无RNase H活性的M-MLV逆转录酶,避免了第一链cDNA合成过程中RNA/DNA杂交体中RNA被降解,具有高效的逆转录活性,适合合成长达9 k的cDNA片段。
产品编号产品规格价格
TK0801350次量 ¥750
TK08015 200次量 ¥1350
产品特点:优化配制了用于第一链cDNA合成反应的各种成分,试剂盒中的ToneScript M-MLV具有高效的逆转录活性,避免了第一链cDNA合成过程中RNA/DNA杂交体中RNA被降解,具有高效的逆转录活性。适合后续的PCR、定量PCR以及PCR克隆,适用于各种PCR耐热聚合酶。
应用举例:反转录性
常见问题解析:1、 没有RT-PCR产物或产量低◆RNA模板降解。RNA 的纯度和完整对于反转录得到全长cDNA是非常重要的。提取的RNA应进行电泳检测以确定其是否降解。同时RNA要避免多次反复冻融。◆RNA模板纯度低。提取RNA的过程中,可能残留一些盐离子、试剂,如 EDTA、酚、胍盐、磷酸盐、多胺等抑制接下来的反转录反应。建议用75%乙醇(DEPC 水配制)仔细清洗RNA沉淀。◆引物不合适。选择合适的引物,当RNA是细菌RNA或者是没有polyA尾的RNA要选择随机引物或者特异引物。◆目的基因含有复杂二级结构或高GC含量。建议选择随机引物进行反转录。将反转录温度提高至55℃。2、RT-PCR 产物比预期长◆RNA 中很可能污染了DNA。真核生物基因组DNA中含有内含子,可能参与了 PCR扩增,可以在反转录之前对RNA进行DNaseI的消化。3、阴性对照中有RT-PCR产物◆阴性对照中有RT-PCR产物也表明有DNA的污染。在反转录之前对RNA进行DNase I 的消化。