“蛋白酶K,丝氨酸蛋白酶”参数说明
类型: | 丝氨酸蛋白酶 | 反应缓冲液: | 50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 |
ph范围之内: | pH 4-12.5 | 保存: | −20°C |
产量: | 10000吨 |
“蛋白酶K,丝氨酸蛋白酶”详细介绍
蛋白酶K
外观:……………………白色或类白色粉末
溶解性:…………………可溶于水:1 mg/mL
酶活:……………………≥30 units/mg protein
用途及描述:科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面。一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,具有很高的比活性。EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活,反而增强和稳定酶活性,并在较广的PH范围内(PH4-12.5)均有活性。分离DNA和RNA期间使核苷酸酶蛋白失活;去除内毒素对阳离子蛋白的约束,如溶菌酶和核糖核酸酶;研究报告显示用于分离肝,酵母,绿豆线粒体。测定细胞膜上的酶;用于抗体标记,石蜡包埋组织切片中暴露抗原结合位点;消化脑组织样本中的蛋白质,用于朊病毒的传染性海绵状脑病(TSE)的研究
储存条件:?20°C,避光防潮密闭干燥。
蛋白酶K的溶解性,蛋白酶K在水中的溶解性,蛋白酶K在生理盐水中的溶解性,蛋白酶K在PBS缓冲液中的溶解性,蛋白酶K在DMSO、乙醇等有机溶剂中的溶解性,蛋白酶K在细胞实验方面的应用,蛋白酶K在大鼠等动物实验方面的应用
蛋白酶K的功能及使用方法:
蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50-100μg/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。
推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。
蛋白酶k配制标准:20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinase K):将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
蛋白酶K的保存:保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效保证12月。
孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。
作用:蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果。EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果。
蛋白酶K的应用比较广泛,它可以消化包围靶DNA蛋白,因此使用蛋白酶K能够增加探针与靶核酸结合的机会增强杂交信号,但在使用蛋白酶K时要主要使用的浓度,过高或者过低都会破坏细胞的结构、核消失等影响试验结果
外观:……………………白色或类白色粉末
溶解性:…………………可溶于水:1 mg/mL
酶活:……………………≥30 units/mg protein
用途及描述:科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面。一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,具有很高的比活性。EDTA等鳌合剂或SDS等去垢剂不能使蛋白酶K失活,反而增强和稳定酶活性,并在较广的PH范围内(PH4-12.5)均有活性。分离DNA和RNA期间使核苷酸酶蛋白失活;去除内毒素对阳离子蛋白的约束,如溶菌酶和核糖核酸酶;研究报告显示用于分离肝,酵母,绿豆线粒体。测定细胞膜上的酶;用于抗体标记,石蜡包埋组织切片中暴露抗原结合位点;消化脑组织样本中的蛋白质,用于朊病毒的传染性海绵状脑病(TSE)的研究
储存条件:?20°C,避光防潮密闭干燥。
蛋白酶K的溶解性,蛋白酶K在水中的溶解性,蛋白酶K在生理盐水中的溶解性,蛋白酶K在PBS缓冲液中的溶解性,蛋白酶K在DMSO、乙醇等有机溶剂中的溶解性,蛋白酶K在细胞实验方面的应用,蛋白酶K在大鼠等动物实验方面的应用
蛋白酶K的功能及使用方法:
蛋白酶K是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。此酶经纯化去除了RNA酶和DNA酶活性。由于蛋白酶K在尿素和SDS中稳定,还具有降解天然蛋白质的能力,因而它应用很广泛,包括制备脉冲电泳的染色体DNA,蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50-100μg/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。
推荐反应缓冲液:50mM Tris-HCl (pH7.5),10mM CaCl2 。
蛋白酶k配制标准:20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinase K):将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中,轻轻摇动,直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml,然后分装成小份贮存于-20℃。
蛋白酶K的保存:保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效保证12月。
孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。
作用:蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果。EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果。
蛋白酶K的应用比较广泛,它可以消化包围靶DNA蛋白,因此使用蛋白酶K能够增加探针与靶核酸结合的机会增强杂交信号,但在使用蛋白酶K时要主要使用的浓度,过高或者过低都会破坏细胞的结构、核消失等影响试验结果
“蛋白酶K,丝氨酸蛋白酶”其他说明
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