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Taq DNA聚合酶

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最后更新: 2017-10-26 12:51
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“Taq DNA聚合酶”参数说明

类别: 分子生物学工具酶 延伸速率: 1kb/min
扩增片段长度: 5kb 用途1: 常规PCR
用途3: 高通量PCR 用途2: 多重PCR

“Taq DNA聚合酶”详细介绍

概述:
Taq DNA聚合酶是一种耐热聚合酶,该酶具有5′→3′聚合酶活性和双链特异性5′→3′核酸外切酶活性(1,2,3)。该酶是PCR中应用最广泛的酶。为了便于各种PCR反应,标准Taq缓冲液不含有非离子变性剂,适用于要求无变性剂的反应的需要(4,5)。
来源:
来源于一种E.coli菌株,此菌株含有来源于Thermus aquaticus YT-1的Taq DNA聚合酶基因。
应用:
1. 常规PCR。
2. 微阵列分析。
3. 高通量PCR。
4. DHPLC。
5. 菌落PCR。
反应条件:
100 μl的反应体系含:1× 标准Taq反应缓冲液 [10 mM Tris-HCl (pH 8.3 @ 25 °C),50 mM KCl,1.5 mM MgCl2],DNA模板,引物,200 μM dNTPs和2-5 U的聚合酶。
质量检测:
5 kb Lambda PCR:以5 ng Lambda DNA为模板,在1× 标准Taq反应缓冲液中加入200 μM dNTPs、0.2 μM引物和2.5 U的聚合酶进行PCR扩增25个循环,获得5 kb特异性产物100 ng。
核酸内切酶活性:50 μl反应体系中,20 U本酶与1 μg的pUC19质粒于37°C下温育4小时,DNA的电泳条带无明显变化。
质保声明:
Taq DNA聚合酶 经过严格的质控检测,确保该产品具有最高的活性和纯度。
单位定义:
1单位指75°C条件下反应30分钟,能使10 nmol的dNTPs掺入酸不溶性沉淀物所需要的酶量。
参考文献:
1. Mattlia, P. et al. (1991) Nucl. Acids Res., 19, 4967-4973.
2. Eckert, K.A. and Kunkel, T.A. (1991) PCR Methods and Applications, 1, 17-24.
3. Kong, H.M. et al. (1993) J. Biol. Chem., 268, 1965-1975.
4. Perler, F. et al. (1992) Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89, 5577-5581.

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